【科普】如何檢測肺炎支原體及其耐藥

肺炎支原體是介于細菌與病毒之間，無細胞壁的一類原核細胞型生物，是目前世界上已知能獨立生存的最小微生物。是引起兒童氣管炎、支氣管炎、非典型性肺炎的重要病原體，也是引起成年人社區(qū)獲得性肺炎的最常見病原之一。

肺炎支原體臨床表現(xiàn)多樣，以各種呼吸道器官炎性反應(yīng)最為多見，如咽炎、肺炎等。此外，肺炎支原體還會導致呼吸器官外的全身各臟器受損，對兒童身體的危害性極大。

由于肺炎支原體無細胞壁，所以對青霉素等作用于細胞壁的抗生素天然耐藥。僅對影響細菌DNA和蛋白質(zhì)合成的大環(huán)內(nèi)酯類、喹諾酮類、氨基糖甙類、四環(huán)素類等藥物有反應(yīng)。

隨著大環(huán)內(nèi)酯類抗生素在臨床的廣泛應(yīng)用，耐藥現(xiàn)象開始出現(xiàn)，自1970年日本學者在世界范圍內(nèi)首次報道了從臨床標本中分離到對紅霉素呈現(xiàn)高度耐藥的臨床MP菌株,之后的30年間陸續(xù)有文獻報道出現(xiàn)對大環(huán)內(nèi)酯類耐藥的MP菌株。2005年辛德莉等首次報道國內(nèi)已有MP耐藥株產(chǎn)生。

MP的耐藥機制主要包括大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的作用部位(核糖體)基因突變及多數(shù)病原體的自身功能改變。

藥物作用靶點基因突變是MP主要的耐藥機制。大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的作用機制主要是通過與MP核糖體的50S亞基23SrRNA上第2063、2064、2607、2067、2617及2611等特殊位點結(jié)合，以選擇性抑制MP的蛋白質(zhì)生物合成和增殖。

常用的檢測方法有MP培養(yǎng)分離、MP-IgM檢測、血清學、熒光PCR等方法。MP培養(yǎng)分離因為需要特殊的培養(yǎng)基、培養(yǎng)時間較長、實驗操作繁瑣，檢出率不高等缺點，臨床上應(yīng)用較少；MP-IgM檢測因為容易受到病程、免疫狀態(tài)以及抗體出現(xiàn)和轉(zhuǎn)化的時間等影響，且在MP感染的早期診斷上性能不足，容易出現(xiàn)假陰性的結(jié)果；血清學方法主要通過檢測出IgM抗體或雙份血清IgG抗體滴度的增高作為感染的指標，由于IgG抗體與機體免疫狀態(tài)有關(guān)，嬰幼兒大都免疫力低下，一般檢測不出抗體，且靈敏度較低。

目前，臨床普遍采用的實時熒光PCR技術(shù)進行感染的早期診斷，只需要MP-DNA少量片段，通過PCR技術(shù)進行擴增就可以進行檢測，靈敏度及特異性高。同時PCR檢測還能夠明確本次感染的MP是否為耐藥株，有助于臨床判斷預后，及時調(diào)整診療措施。

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